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MyGo Pro PCR (定量聚合酶鏈式反應(yīng))儀器用戶手冊的使用指南
發(fā)布時間:2025-06-17 11:46:28 | 瀏覽量:96

MyGo Pro PCR 儀器用戶手冊的使用指南

1. MyGo Pro PCR 儀器的原理、功能與用途

原理

MyGo Pro 是一款基于聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù)的實時定量 PCR(qPCR)儀器,通過熱循環(huán)實現(xiàn) DNA 或 RNA 的擴增。其核心技術(shù)是“全光譜光學”(Full Spectrum Optics),利用高強度 LED(500 nm 激發(fā))和 CMOS 相機(510-750 nm 檢測),從每個反應(yīng)管并行收集 120 個光學通道的熒光數(shù)據(jù),無需移動部件,確保多重 PCR 的可靠性。此外,MyGo Pro 支持高分辨率融解曲線(HRM)分析,能夠區(qū)分所有類型的單核苷酸多態(tài)性(SNP),包括 Class 4 SNP。

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功能

MyGo Pro 提供以下關(guān)鍵功能:

  • 高精度和靈敏度:單拷貝檢測,9 日志動態(tài)范圍,1.1 倍區(qū)分精度。

  • 多重 PCR:支持至少 7 個目標同時分析,每個目標使用不同熒光標簽。

  • 快速熱循環(huán):加熱速度 5°C/秒,冷卻速度 4°C/秒,45 個循環(huán)約 33 分鐘,總運行時間少于 40 分鐘。

  • HRM 分析:結(jié)合熱控制、光學數(shù)據(jù)質(zhì)量和 HRM 數(shù)據(jù)分析,高效區(qū)分遺傳變異。

  • 自動化分析:軟件支持絕對和相對定量、融解曲線分析、端點基因分型和 HRM。

  • 技術(shù)規(guī)格

    • 熱均勻性:±0.1°C

    • 熱精度:±0.25°C

    • 溫度范圍:37-99°C

    • 光學通道:4 個(多重),支持 SYBR Green I、FAM、ROX 等 22 種預校準染料

    • 支持的檢測格式:TaqMan、Molecular Beacons、SimpleProbes?、Intercalators、HRM

以下表格總結(jié)了主要功能:

功能類別詳情
檢測靈敏度單拷貝檢測,9 日志動態(tài)范圍,1.1 倍區(qū)分精度
熱循環(huán)速度加熱 5°C/秒,冷卻 4°C/秒,45 循環(huán)約 33 分鐘
光學系統(tǒng)120 個光學通道,510-750 nm 檢測,CMOS 相機
支持染料SYBR Green I、FAM、ROX 等 22 種
分析模塊絕對/相對定量、融解曲線、HRM 等

用途

MyGo Pro 廣泛應(yīng)用于:

  • 基因表達分析:檢測 10% 的轉(zhuǎn)錄本濃度差異。

  • 病原體檢測:量化病原體水平。

  • 遺傳變異分析:通過 HRM 識別 SNP。

  • 實驗室研究:適用于生命科學、食品物種鑒定、病毒檢測等。

  • 高通量應(yīng)用:單臺計算機可控制 200 臺 MyGo Pro 或 400 臺 MyGo Mini。

2. MyGo Pro PCR 儀器的安裝與設(shè)置流程

安裝步驟

  1. 檢查組件

    • 確認包裝包含:MyGo Pro qPCR 系統(tǒng)、用戶手冊、電源適配器和電纜、以太網(wǎng)電纜、USB 驅(qū)動器。

    • 檢查是否有損壞或缺失部件。

  2. 連接電源

    • 使用 24V DC 電源適配器,3 針 IEC 連接器。

    • 儀器無開關(guān)電源,可選購開關(guān)電纜。

  3. 選擇連接方式

    • USB:使用 MyGo 品牌 USB 驅(qū)動器,包含軟件和手冊。第三方 USB 需通過軟件速度測試。

    • 以太網(wǎng):連接到 LAN 或直接連接計算機。

  4. 軟件安裝

    • 從 USB 驅(qū)動器或 網(wǎng)上 下載 MyGo 軟件。

    • 兼容 Windows、Mac OS X 和 Linux,無許可證限制。

  5. 環(huán)境設(shè)置

    • 放置在穩(wěn)固、干燥的實驗室臺面,遠離氣流。

    • 確保通風口暢通,避免覆蓋。

    • 加熱蓋在實驗中加熱至 105°C,實驗后勿觸碰。

設(shè)置注意事項

  • 通風:勿在加熱蓋上放置物品或液體,以免影響性能。

  • 環(huán)境條件:參考用戶手冊中的操作、運輸和存儲條件。

  • 運輸:使用飛行箱或原包裝,放置聚苯乙烯圓圈保護井。

以下表格總結(jié)了安裝步驟:

步驟詳情
檢查組件確認儀器、電源適配器、電纜、USB 驅(qū)動器等齊全
連接電源使用 24V DC 電源,3 針 IEC 連接器
連接方式USB 或以太網(wǎng),USB 需通過速度測試
軟件安裝從 網(wǎng)上下載,兼容多平臺
環(huán)境設(shè)置穩(wěn)固臺面,遠離氣流,確保通風

3. MyGo Pro PCR 儀器的連接與運行實驗的方法

連接方法

  • USB 連接

    • 插入 MyGo 品牌 USB 驅(qū)動器,確保包含實驗文件。

    • 使用 USB 延長電纜(MyGo Mini 適用)。

  • 以太網(wǎng)連接

    • 使用以太網(wǎng)電纜連接到 LAN 或計算機。

    • 確保網(wǎng)絡(luò)設(shè)置正確,避免數(shù)據(jù)丟失。

運行實驗步驟

  1. 準備樣本

    • 使用 0.1 ml 管或 8 管條,最多 32 個樣本,反應(yīng)體積 10-100 μl。

    • 單 8 管條運行時,需在第 1 和第 4 行加載空管條。

  2. 設(shè)置實驗

    • 在 MyGo 軟件中創(chuàng)建模板:點擊“打開”,選擇“模板”文件類型。

    • 設(shè)置樣本和目標信息,可在實驗運行中修改。

    • 配置溫度循環(huán)參數(shù)(如保持時間、循環(huán)次數(shù))。

  3. 啟動實驗

    • 通過 USB 或 LAN 啟動,實驗開始后無法更改設(shè)置。

    • 蓋子自動鎖定,實驗結(jié)束后解鎖(顯示青色)。

  4. 監(jiān)控實驗

    • 軟件顯示實時溫度和熒光數(shù)據(jù)。

    • 背景校正:6 個循環(huán)后自動校正(基于第 4、5、6 循環(huán)平均值)。

  5. 數(shù)據(jù)保存

    • 保存到 PC 或 USB 驅(qū)動器,LAN 連接需確保網(wǎng)絡(luò)穩(wěn)定。

注意事項

  • 耗材:使用氣密性好、光學透明的耗材。

  • 染料:預校準 22 種染料(如 FAM、ROX),非預校準染料需生成染料文件。

  • 數(shù)據(jù)管理:使用 USB 驅(qū)動器減少網(wǎng)絡(luò)不穩(wěn)定導致的數(shù)據(jù)丟失。

以下表格總結(jié)了運行實驗步驟:

步驟詳情
樣本準備0.1 ml 管或 8 管條,10-100 μl 反應(yīng)體積
實驗設(shè)置創(chuàng)建模板,設(shè)置樣本和目標,配置溫度循環(huán)
啟動實驗通過 USB 或 LAN 啟動,蓋子自動鎖定
數(shù)據(jù)監(jiān)控實時查看溫度和熒光數(shù)據(jù),自動背景校正
數(shù)據(jù)保存保存到 PC 或 USB,LAN 需穩(wěn)定網(wǎng)絡(luò)

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4. MyGo Pro PCR 儀器的使用提示與技巧

使用技巧

  • 耗材選擇

    • 使用 MyGo 推薦耗材,確保密封性和熱傳導效率。

    • 第三方耗材需氣密、光學透明、生物相容、無 DNA/RNA 酶。

  • 樣本處理

    • 確保管蓋密封良好,避免泄漏。

    • 佩戴手套操作,實驗后立即處理 PCR 管,防止污染。

  • 實驗優(yōu)化

    • 使用非熒光淬滅劑(如 BHQ)以獲得最佳熒光信號。

    • 熒光淬滅劑(如 TAMRA)需在樣本設(shè)置中添加以啟用光譜去卷積。

  • 軟件使用

    • 使用模板快速啟動實驗。

    • 定期檢查 獲取軟件更新。

維護建議

  • 清潔

    • 儀器臟污或污染時,參考去污指南。

    • 送修前確保清潔。

  • 校準

    • 無需定期光學或熱校準,損壞時聯(lián)系技術(shù)支持。

  • 運輸

    • 減少移動,使用聚苯乙烯圓圈保護井,使用飛行箱或原包裝。

以下表格總結(jié)了使用提示:

類別提示
耗材選擇使用 MyGo 推薦耗材,確保密封和光學透明
樣本處理密封管蓋,佩戴手套,立即處理用過的 PCR 管
實驗優(yōu)化使用非熒光淬滅劑,添加熒光淬滅劑到樣本設(shè)置
維護定期清潔,無需定期校準,安全運輸

5. MyGo Pro PCR 儀器的常見故障解決方法

常見問題及解決方案

  • 儀器不開機

    • 檢查電源電纜是否牢固連接到儀器和插座。

  • 實驗無法啟動

    • 確保管子正確加載,MyGo Mini 蓋子牢固關(guān)閉。

    • 檢查網(wǎng)絡(luò)設(shè)置(LAN 運行)。

  • 網(wǎng)絡(luò)連接失敗

    • 確保以太網(wǎng)電纜插入時聽到“咔嗒”聲,輕輕拉動確認不松動。

  • 實驗無法完成

    • 不要在 LAN 運行時關(guān)閉軟件或斷開網(wǎng)絡(luò)。

  • USB 運行問題

    • 確保 USB 驅(qū)動器牢固連接,包含實驗文件。

    • 實驗完成前勿移除 USB(MyGo Pro 顯示青色)。

  • 儀器閃爍紅色

    • 開機,若持續(xù)閃爍,聯(lián)系技術(shù)支持。

其他注意事項

  • 數(shù)據(jù)丟失:LAN 不穩(wěn)定時使用 USB 驅(qū)動器。

  • 污染:參考去污指南清潔儀器。

以下表格總結(jié)了故障排除方法:

問題解決方案
儀器不開機檢查電源電纜連接
實驗無法啟動確認管子加載,檢查網(wǎng)絡(luò)設(shè)置
網(wǎng)絡(luò)連接失敗確保以太網(wǎng)電纜牢固連接
USB 運行問題確認 USB 驅(qū)動器連接,勿提前移除
閃爍紅色開機,持續(xù)閃爍聯(lián)系技術(shù)支持

總結(jié)

MyGo Pro PCR 儀器是一款高效、可靠的 qPCR 系統(tǒng),適用于多種分子生物學應(yīng)用。其全光譜光學和快速熱循環(huán)技術(shù)確保高精度和多重分析能力。安裝和設(shè)置簡單,運行實驗通過用戶友好的軟件完成。遵循使用提示和維護建議可確保最佳性能,常見故障可通過檢查連接和設(shè)置解決。

 
 
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